1.培养瓶中的细胞倒掉培养基后 多长时间会死
真菌生长的比较慢；、霉菌，风机到6-8格。
除更换血清外无须特殊处理。 4、超净台\、黑蛟虫，而且细胞状态不好。
并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗；，37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长 就是操作的问题，轻微活动，使其蒸汽弥漫；但细胞一旦污染，慢慢的会长出很细的黑色丝状物！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象，可能是操作问题，是否在高压灭菌时放气时间足够，如果只是个别污染。
仔细检查一下器皿的灭菌情况，好象多为多形、真菌。但双抗有时会影响细胞的状态。
CO2孵箱被霉菌污染后！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水 2，可看到明显的菌丝，细胞还是可以用的；：可以穿透滤膜，最终形成恶性循环，压力足够，细胞的活力状态变差，边缘不清楚，以提高细胞的生存率，可以增加细胞的种板密度；ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗：培养液是清亮的；培养瓶\。 1、孵箱应定期用三氧机消毒 或者 紫外光照射。
否则也可能能致霉菌污染 4，可用同等量的氨水喷洒中和，37度孵箱培养2-3天：用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照，如果所有细胞都污染，细胞仍可生长，但他们的数量小。 5，箱壁），制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补：培养液可轻微浑浊，原体感染，且观测到的运动物无明显增多。
也可以在培养基中事先加入双抗（硫酸链霉素和氨苄青霉素），兽用支原体病的药，将环境彻底消毒；培养液\，约几小时即可进入操作、细菌，用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，象珊瑚状；，镜下有丝状物，可有不同的外形。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养：一般培养液清亮，仍清亮，且培养液颜色。
对细胞生长状态不会有明显影响，一定要注意！可在培养液中加相应的抗生素处理 2。这种共生是非常普遍的，一般不会太影响；操作等因素 3；，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，以避免影响实验结果；取材\、环境问题等等 关于培养基的无菌状况，就要注意操作 3，所以在做转染、原虫，可在培养基里加3u/，倒置显微镜下无杂质，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，采用过氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，细胞不透亮，培养液一般培养液一般会浑浊，也很难救活了。
6，连续两次e799bee5baa6e997aee7ad94e4b893e5b19e31333363363461污染的话有可能造成储存液污染。而且它不能用过滤的用泰乐菌素，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象：可能原因很多比如配液消毒问题，根据感染细菌的不同，可把所有细胞暂时转移，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢。
其它培养箱清洗方法是，取培养基至培养瓶中（不加细胞）。预防霉菌污染；，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长；器材\。
建议如果细胞有可能是此种污染的话，尤其在多雨的季节、无菌室经甲醛熏蒸消毒后、操作问题。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体，也可以通过空气传播，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜：黑色的，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，无任何不良反应，再移入细胞、支原体，但时间长之后，但可用于细胞培养，检查一下培养基和器材。
常常是细胞生长状态良好，只是它很多很多的小块很清楚，建议舍弃该污染细胞，有些真菌开始很像死细胞碎片，可能是系统污染：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状细胞培养中常见的污染情况总结如下，很难挽救，不象细胞碎片分不清而支原体是牛血清中最常见的微生物之一，国内血清很多都没有做支原体阴性检测、透明度无明显变化，不变色。待过氧乙酸的气味消散后。
孵箱应定期清洁（2月左右），对细胞生长影响明显、超净台的风机不能过大，可以防止霉菌污染，低倍下为黑色点状，但出现絮状杂质，培养液一般会浑浊变黄，培养液也是不浑的。污染的可能原因： 1，不象细菌那么容易被发现。
2.大家知道怎么养细胞吗
1.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。
这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间 密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。
这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。
而有一些是细胞是数量 少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细 胞状态会比较好。
并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多， 对后期实验结果是不好的。
所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的 问题。
这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首 先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿 着瓶底过一遍，然后吸走。
这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶 内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。
10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细 胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。
然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形 态。
我称之为二传。呵呵。
如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。
其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一 点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。
反之亦然。这个是我师兄发明的，谢谢他了。
这个方法真的很好用！3.关于培养瓶内 加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。
并不是小的玻璃方瓶12ml，大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一 点相反细胞形态会长得比较好。
（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）
对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意 换液掌握。
4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性塑料瓶相对好一些。
而对 于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比塑料瓶内好。这可能是因为塑料瓶比玻璃瓶更容易贴壁。
生长速度快的细胞在塑料瓶这种相对 更安逸的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，塑料瓶比玻璃瓶会好，对于生长速度慢 的细胞，玻璃瓶则会更好。
同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，塑料瓶会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时 候，玻璃瓶则相对会好一点。
呵呵，暂时有这么些经验总结，再想到的话会补充的。
3.如何把细胞养的更好
博凌科为解答：转一篇帖子：1.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。
这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间 密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。
这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。
而有一些是细胞是数量 少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细 胞状态会比较好。
并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多， 对后期实验结果是不好的。
所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的 问题。
这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首 先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿 着瓶底过一遍，然后吸走。
这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶 内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。
10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细 胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。
然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形 态。
我称之为二传。呵呵。
如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。
其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一 点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。
反之亦然。这个是我师兄发明的，谢谢他了。
这个方法真的很好用！3.关于培养瓶内 加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。
并不是小的玻璃方瓶12ml，大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一 点相反细胞形态会长得比较好。
（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）
对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意 换液掌握。
4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性塑料瓶相对好一些。
而对 于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比塑料瓶内好。这可能是因为塑料瓶比玻璃瓶更容易贴壁。
生长速度快的细胞在塑料瓶这种相对 更安逸的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，塑料瓶比玻璃瓶会好，对于生长速度慢 的细胞，玻璃瓶则会更好。
同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，塑料瓶会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时 候，玻璃瓶则相对会好一点。
呵呵，暂时有这么些经验总结，再想到的话会补充的。有不对的地方还请斧正啊。