1.花卉生物培养基配制配方
二、实验材料和用具 牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡萄糖、孟加拉红、链霉素、1mol/L NaOH、lmol/L HCl、KNO3、NaCl、K2HPO4•3H2O、MgSO4•7H2O、FeSO4•7H2O。
试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、牛角匙、pH试纸、棉花、牛皮纸、记号笔、线绳、纱布、漏斗、漏斗架、胶管、止水夹等。三、操作步骤（一）牛肉膏蛋白胨培养基的配制牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
其配方如下：牛肉膏3g，蛋白胨10g,Nacl5g，琼脂15~20g，水1000mL,PH7.4~7.6 1.称药品 按实际用量计算后，按配方称取各种药品放入大烧杯中。牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶解后倒入大烧杯；也可放在称量纸上称量，随后放入热水中，牛肉膏使与称量纸分离，立即取出纸片。
蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速。2.加热溶解 在烧杯中加入少于所需要的水量，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至所需量。
若配制固体培养基，则将称好的琼脂放入己溶解的药品中，再加热融化，此过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，最后补足所失的水分。3. 调pH 检测培养基的pH，若pH偏酸，可滴加lmol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸检测，直至达到所需pH范围。
若偏碱，则用lmol/L HCl进行调节。pH的调节通常放在加琼脂之前。
应注意pH值不要调过头，以免回调而影响培养基内各离子的浓度。4.过滤 液体培养基可用滤纸过滤，固体培养基可用4层纱布趁热过滤，以利培养的观察。
但是供一般使用的培养基，这步可省略。5.分装 按实验要求，可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内。
分装时可用漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上而造成污染。分装量：固体培养基约为试管高度的l/5，灭菌后制成斜面。
分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜。半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
6.加棉塞 试管口和三角瓶口塞上用普通棉花（非脱脂棉）制作的棉塞。棉塞的形状、大小和松紧度要合适，四周紧贴管壁，不留缝隙，才能起到防止杂菌侵入和有利通气的作用。
要使棉塞总长约3/5塞入试管口或瓶口内，以防棉塞脱落。有些微生物需要更好的通气，则可用8层纱布制成通气塞。
有时也可用试管帽或塑料塞代替棉塞。7.包扎 加塞后，将三角瓶的棉塞外包一层牛皮纸或双层报纸，以防灭菌时冷凝水沾湿棉塞。
若培养基分装于试管中，则应以5支或7支在一起，再于棉塞外包一层牛皮纸，用绳扎好。然后用记号笔注明、培养基名称、组别、日期。
8.灭菌 将上述培养基于121.3℃湿热灭菌20min。如因特殊情况不能及时灭菌，则应故人冰箱内暂存。
9.摆斜面 灭菌后，如制斜面，则需趁热将试管口端搁在一根长木条上，并调整斜度，便斜面的长度不超过试管总长的1/2。10.无菌检查 将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24~48h，无菌生长即可使用，或贮存于冰箱或清洁的橱内，备用。
（二）高氏l号培养基的配制高氏1号培养基是用于分离和培养放线菌的合成培养基。其配方如下：可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCl 0.5g,K2HPO4•3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O 0.5g,FeSO4•7H2O 0.01g，琼脂15~20g，水1000mL,pH7.4~7.6。
l.称量和溶解 先计算后称量，按用量先称取可溶性淀粉，放入小烧杯中，并用少量冷水将其调成糊状，再加至少于所需水量的水，继续加热，边加热边搅拌，至其完全溶解。再加入其他成分依次溶解。
对微量成分FeSO4•7H2O可先配成高浓度的贮备液后再加入，方法是先在1000mL中加入1g的FeSO4•7H2O，配成浓度为0.01g/mL的贮备液，再在1000mL培养基中加入以上贮备液1mL即可。待所有药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。
如要配制固体培养基，其琼脂溶解过程同牛肉膏蛋白胨培养基配制。2.pH调节、分装、包扎及无菌检查 同牛肉膏蛋白胨培养基配制。
（三）马丁氏培养基的配制马丁氏培养基是用于分离真菌的选择培养基。其配方如下：K2HPO4 1g,MgSO4•7H2O 0.5g，蛋白胨5g，葡萄糖l0g，琼脂15~20g，水1000mL，自然pH。
1.称量和溶解 先计算后称量，按用量称取各成分，并将其溶解在少于所需的水中。待各成分完全溶解后，补充水分到所需体积。
再将孟加拉红配成1%的水溶液，在1000mL培养液中加入以上孟加拉红溶液3.3mL，混匀后，加入琼脂加热融化，方法同牛肉膏蛋白胨培养基配制。2.分装、包扎、灭菌及无菌检查同牛肉膏蛋白膝培养基配制。
3.链霉素的加入 链霉素受热容易分解，所以临用时，将培养基融化后待温度降至45℃左右时才能加入。可先将链霉素配成1%的溶液（配好的链霉素溶液保存于-20℃），在100mL培养基中加1%链霉素0.3mL ，使每毫升培养基中合链霉素30μg。
四、注意事项 称药品用的牛角匙不要混用，称完药品应及时盖紧瓶盖。调pH时要小心操作，避免回调。
不同培养基各有配制特点，要注意具体操作。五、实验报告记录本实验配制培养基的名称、数量，并图解说明其配制过程，指明要点。
六、问题和思考l.配制培养基有哪几个步骤？在操作过程中应注意些什么问题？为什么？2.培养基配制完成后。
2.花卉快速繁殖培养基一般包括基础成分
.培养基的配制：对于经常使用的培养基，可先将各种药品配成10倍或100倍的母液，放入2~4℃的冰箱中保存，用时再按比例稀释。
(1)母液的配制：
①大量元素母液.配成10倍液。用感量0.01克天平称取大量元素，分别溶解后按顺次混合，加蒸馏水使其总量达1升，即为大量元素的母液。配培养基时，每配1升取母液100毫升。
②微量元素母液：因用量小，常配成100倍或1000倍母液，即将每种化合物的量加大100倍或1000倍。逐次溶解并混在一起。在配制1升培养基时，取母液10毫升或1毫升。为了配制不同培养基时使用方便，也可将维生素类物质分别配制。配制时用感量0.001克的天平称取。
③铁盐母液：铁盐是单独配制的，用感量0.01克天平称取，分别溶解、混合加水定容至500毫升。每升培养基取此液5毫升。
④维生素母液：用感量0.001克的天平称量，分别用容量瓶配成所需的浓度（0.1~10毫克/升），用时按培养基配方中要求的量分别加入。
⑤植物激素的配制：单个称量，分别贮藏，一般配成0.1~0.5毫克/毫升的溶液。由于多数激素难溶于水，可采
用以下方法配制。IAA（叫噪乙酸）：先溶于少量95%酒精中，再加水至一定浓度。NAA（蔡乙酸）：可溶于热水中，也可用少量95%酒精溶解，再加水至一定浓度。2,4一D：不溶于水中，可用lmol/L的NaOH溶解后，再加水至一定浓度。犷KT(6一吠喃氨基嗓吟)及BA(6一苇基嗦岭)：先溶于少量的Imol/L盐酸中，再加水至一定浓度。激素的用量，一般采用ppm及mol/L表示。
(2)培养基的配制：
①根据采用培养基配方的要求，从母液中取出（用量筒或移液管）所需要的大量元素、微量元素、铁盐、维生素及
植物激素等，放于烧杯中，加蒸馏水补足1000毫升。
②把琼脂放入少量水中，加热使其溶化后，加入①中，并不断搅动使其混合均匀。
③用pH计或pH试纸测pH值。用Imol/L的氢氧化钠或Imol/L的盐酸，将pH值调至要求的值。
④把配好的培养基用漏斗分装到培养用的玻璃容器内（试管、三角瓶或罐头瓶均可）。这些玻璃器皿要事先清洗干净、烤干。分装后用牛皮纸、铝铂纸或用2~3层称量纸包扎封口。准备高压灭菌。
⑤高压灭菌。一般采用1.1公斤/平方厘米压力消毒15~ 2O分钟。不可时间过长或温度过高，以免引起培养基的不和变化。灭菌后的培养基最好置于4~5℃条件下保存，含IAA的培养基要在一周内使用，其他培养基也不要超过一个月。正常情况下半月内用完。